Eskerrik asko nature.com bisitatzeagatik. Erabiltzen ari zaren arakatzailearen bertsioak CSS laguntza mugatua du. Esperientzia onena lortzeko, arakatzailearen azken bertsioa erabiltzea gomendatzen dizugu (edo Internet Explorer-en bateragarritasun modua desaktibatzea). Gainera, laguntza jarraitua bermatzeko, gune honek ez ditu estiloak edo JavaScript-ak izango.
Melamina elikagai-kutsatzaile aitortua da, eta zenbait elikagai-kategoriatan egon daiteke, bai nahita bai nahita. Ikerketa honen helburua haurrentzako formulan eta esne-hautsean melaminaren detekzioa eta kuantifikazioa egiaztatzea izan zen. Irango eskualde desberdinetako 40 elikagai-lagin aztertu ziren guztira, haurrentzako formula eta esne-hautsa barne. Laginen melamina-edukia gutxi gorabehera zehaztu zen errendimendu handiko kromatografia likido-ultramore (HPLC-UV) sistema bat erabiliz. Kalibrazio-kurba bat (R2 = 0.9925) eraiki zen 0.1-1.2 μg mL−1 tartean melamina detektatzeko. Kuantifikazio- eta detekzio-mugak 1 μg mL−1 eta 3 μg mL−1 izan ziren, hurrenez hurren. Melamina haurrentzako formulan eta esne-hautsean aztertu zen, eta emaitzek erakutsi zuten haurrentzako formulan eta esne-hauts laginetan melamina-mailak 0.001-0.095 mg kg−1 eta 0.001-0.004 mg kg−1 zirela, hurrenez hurren. Balio hauek EBko legediarekin eta Codex Alimentarius-ekin bat datoz. Garrantzitsua da kontuan izatea melamina-eduki murriztua duten esneki horien kontsumoak ez duela arrisku nabarmenik kontsumitzaileen osasunerako. Arriskuen ebaluazioaren emaitzek ere hori berresten dute.
Melamina C3H6N6 formula molekularra duen konposatu organiko bat da, zianamidatik eratorria. Oso disolbagarritasun txikia du uretan eta gutxi gorabehera % 66 nitrogenoa du. Melamina oso erabilia den industria-konposatu bat da, plastikoak, ongarriak eta elikagaiak prozesatzeko ekipoak ekoizteko (elikagaien ontziak eta sukaldeko tresnak barne)1,2 erabilera legitimo ugari dituena. Melamina gaixotasunak tratatzeko sendagai-garraiatzaile gisa ere erabiltzen da. Melaminaren nitrogeno proportzio handiak konposatuaren erabilera okerra ekar dezake eta proteina molekulen propietateak elikagaien osagaiei ematea3,4. Beraz, melamina elikagaietan, esnekiak barne, gehitzeak nitrogeno edukia handitzen du. Horrela, oker ondorioztatu zen esnearen proteina edukia benetan baino handiagoa zela.
Gehitzen den melamina gramo bakoitzeko, elikagaien proteina edukia % 0,4 handituko da. Hala ere, melamina oso disolbagarria da uretan eta kalte larriagoak eragin ditzake. Esnea bezalako produktu likidoei 1,3 gramo melamina gehitzeak esnearen proteina edukia % 30 handitu dezake5,6. Melamina animalien eta baita gizakien elikagaiei ere gehitzen zaien arren proteina edukia handitzeko7, Codex Alimentarius Batzordeak (CAC) eta agintari nazionalek ez dute melamina elikagaien gehigarri gisa onartu eta arriskutsu gisa zerrendatu dute irentsi, arnastu edo larruazaletik xurgatzen bada. 2012an, Osasunaren Mundu Erakundearen (OME) Minbiziaren Ikerketarako Nazioarteko Agentziak melamina 2B klaseko kartzinogeno gisa zerrendatu zuen, gizakien osasunerako kaltegarria izan daitekeelako8. Melaminarekiko esposizio luzeak minbizia edo giltzurrunetako kalteak eragin ditzake2. Elikagaietako melaminak azido zianurikoarekin konplexu egin dezake uretan disolbaezinak diren kristal horiak sortzeko, eta horrek giltzurruneko eta maskuriko ehunei kalteak eragin ditzake, baita gernu-bideetako minbizia eta pisu galera ere9,10. Elikagaien intoxikazio akutua eragin dezake eta, kontzentrazio altuetan, heriotza, batez ere haurtxoetan eta haur txikietan.11 Osasunaren Mundu Erakundeak (OME) melaminaren eguneroko ingesta onargarria (EGI) gizakientzat 0,2 mg/kg gorputz-pisuan ezarri du eguneko, CAC jarraibideen arabera.12 AEBetako Elikagai eta Sendagaien Administrazioak (AEBetako FDA) melaminaren hondakin-maila maximoa 1 mg/kg-tan ezarri du haurrentzako esne-formulan eta 2,5 mg/kg beste elikagai batzuetan.2,7 2008ko irailean, jakinarazi zen hainbat haurrentzako esne-formula fabrikatzailek melamina gehitu ziotela esne-hautsari beren produktuen proteina-edukia handitzeko, eta horrek esne-hautsaren intoxikazioa eragin zuen eta melamina-intoxikazio kasu nazional bat eragin zuen, 294.000 haur baino gehiago gaixotu eta 50.000 baino gehiago ospitaleratu zituena.13
Bularra ematea ez da beti posible hainbat faktorerengatik, hala nola hiri-bizitzaren zailtasunak, amaren edo haurraren gaixotasunak, eta horrek haurtxoak elikatzeko formula erabiltzea dakar. Ondorioz, fabrikak sortu dira ama-esnearen konposizioan ahalik eta antzekoena den haurtxoentzako formula ekoizteko14. Merkatuan saltzen den haurtxoentzako formula normalean behi-esnetik egiten da eta normalean gantz, proteina, karbohidrato, bitamina, mineral eta beste konposatu batzuen nahasketa berezi batekin egiten da. Ama-esnearen antzekoa izateko, formularen proteina eta gantz edukia aldatu egiten da, eta esne motaren arabera, konposatuekin aberasten dira, hala nola bitaminak eta mineralak, hala nola burdina15. Haurtxoak talde sentikorra direnez eta intoxikazio arriskua dagoenez, esne-hautsaren kontsumoaren segurtasuna funtsezkoa da osasunerako. Txinako haurtxoen artean melamina intoxikazio kasuaren ondoren, mundu osoko herrialdeek arreta handia jarri diote gai honi, eta arlo honen sentikortasuna ere handitu egin da. Hori dela eta, bereziki garrantzitsua da haurtxoentzako formula ekoizpenaren kontrola indartzea, haurtxoen osasuna babesteko. Elikagaietan melamina detektatzeko hainbat metodo daude, besteak beste, errendimendu handiko likido kromatografia (HPLC), elektroforesia, metodo sentsorialak, espektrofotometria eta antigeno-antigorputz entzima-lotutako immunosorbente analisia16. 2007an, AEBetako Elikagai eta Droga Administrazioak (FDA) HPLC metodo bat garatu eta argitaratu zuen elikagaietan melamina eta azido zianurikoa zehazteko, eta hau da melamina edukia zehazteko metodorik eraginkorrena17.
Haur-esne-formulan melamina-kontzentrazioak, infragorri-espektroskopia teknika berri bat erabiliz neurtuak, 0,33 eta 0,96 miligramo artekoak ziren kilogramoko (mg kg-1). 18 Sri Lankan egindako ikerketa batek aurkitu zuen esne-hauts osoko melamina-mailak 0,39 eta 0,84 mg kg-1 artekoak zirela. Horrez gain, inportatutako haur-esne-formula laginetan zeuden melamina-maila altuenak, 0,96 eta 0,94 mg/kg, hurrenez hurren. Maila hauek arauzko mugaren azpitik daude (1 mg/kg), baina kontsumitzaileen segurtasunerako jarraipen-programa bat behar da. 19
Hainbat ikerketek aztertu dituzte Irango haurrentzako formuletan dauden melamina mailak. Laginen % 65 inguruk melamina zuten, batez beste 0,73 mg/kg-koa eta gehienez 3,63 mg/kg-koa. Beste ikerketa batek jakinarazi zuen haurrentzako formuletan dagoen melamina maila 0,35 eta 3,40 μg/kg artekoa zela, batez beste 1,38 μg/kg-koa izanik. Oro har, Irango haurrentzako formuletan dagoen melaminaren presentzia eta maila hainbat ikerketetan ebaluatu dira, eta melamina duten lagin batzuek agintari arautzaileek ezarritako gehienezko muga (2,5 mg/kg/pentsu) gainditzen dute.
Elikagaien industrian esne-hautsaren zuzeneko eta zeharkako kontsumo izugarria eta haurrentzako esne-formulak haurrak elikatzeko duen garrantzi berezia kontuan hartuta, ikerketa honek esne-hautsean eta haurrentzako esne-formulan melamina detektatzeko metodoa balioztatzea izan zuen helburu. Izan ere, ikerketa honen lehen helburua haurrentzako esne-formulan eta esne-hautsean melamina adulterazioa detektatzeko metodo kuantitatibo azkar, sinple eta zehatz bat garatzea izan zen, errendimendu handiko kromatografia likidoa (HPLC) eta izpi ultramoreen (UV) detekzioa erabiliz; Bigarrenik, ikerketa honen helburua Irango merkatuan saltzen diren haurrentzako esne-formulan eta esne-hautsean melamina edukia zehaztea izan zen.
Melamina aztertzeko erabiltzen diren tresnak elikagaiak ekoizten diren tokiaren arabera aldatzen dira. HPLC-UV analisi metodo sentikor eta fidagarri bat erabili zen esnean eta haurrentzako esne-formulan melamina hondakinak neurtzeko. Esnekiek hainbat proteina eta gantz dituzte, eta horiek melaminaren neurketan eragin dezakete. Beraz, Sun et al.-ek 22 adierazi bezala, garbiketa estrategia egoki eta eraginkor bat beharrezkoa da analisi instrumentala egin aurretik. Ikerketa honetan, botatzeko xiringa iragazkiak erabili ditugu. Ikerketa honetan, C18 zutabe bat erabili dugu haurrentzako esne-formulan eta esne-hautsean melamina bereizteko. 1. irudiak melamina detektatzeko kromatograma erakusten du. Horrez gain, 0,1-1,2 mg/kg melamina zituzten laginen berreskurapena % 95etik % 109ra bitartekoa izan zen, erregresio ekuazioa y = 1,2487x − 0,005 (r = 0,9925) izan zen, eta desbideratze estandar erlatiboaren (RSD) balioak % 0,8tik % 2ra bitartekoak izan ziren. Eskuragarri dauden datuek adierazten dute metodoa fidagarria dela aztertutako kontzentrazio-tartean (1. taula). Melaminaren detekzio-muga instrumentala (LOD) eta kuantifikazio-muga (LOQ) 1 μg mL−1 eta 3 μg mL−1 izan ziren, hurrenez hurren. Gainera, melaminaren UV espektroak 242 nm-tan xurgapen-banda bat erakutsi zuen. Detekzio-metodoa sentikorra, fidagarria eta zehatza da. Metodo hau melamina-maila ohiko zehaztapenerako erabil daiteke.
Hainbat egilek antzeko emaitzak argitaratu dituzte. Esnekietan melamina aztertzeko errendimendu handiko kromatografia likido-fotodiodoen matrizea (HPLC) metodo bat garatu zen. Kuantifikazioaren beheko mugak 340 μg kg−1 esne hautsarentzat eta 280 μg kg−1 haurrentzako formularentzat izan ziren 240 nm-tan. Filazzi et al. (2012) jakinarazi zuten melamina ez zela haurrentzako formulan detektatu HPLC bidez. Hala ere, esne hauts laginen % 8k melamina zuten 0,505–0,86 mg/kg-ko mailan. Tittlemiet et al.23 antzeko ikerketa bat egin zuten eta haurrentzako formulan (lagin zenbakia: 72) errendimendu handiko kromatografia likido-masa espektrometria/MS (HPLC-MS/MS) melamina edukia gutxi gorabehera 0,0431–0,346 mg kg−1 zela zehaztu zuten. Venkatasamy et al.-ek egindako ikerketa batean... (2010) ikerketan, kimika berdearen ikuspegi bat (azetonitrilorik gabe) eta alderantzizko faseko errendimendu handiko likido-kromatografia (RP-HPLC) erabili ziren haurrentzako formulan eta esnean melamina kalkulatzeko. Laginaren kontzentrazio-tartea 1,0 eta 80 g/mL artekoa izan zen eta erantzuna lineala izan zen (r > 0,999). Metodoak 97,2-101,2ko berreskurapenak erakutsi zituen 5-40 g/mL arteko kontzentrazio-tartean eta erreproduzigarritasuna % 1,0ko desbideratze estandar erlatiboa baino txikiagoa izan zen. Gainera, behatutako LOD eta LOQ 0,1 g mL−1 eta 0,2 g mL−124 izan ziren, hurrenez hurren. Lutter et al. (2011) ikerketan behi-esnean eta esne-oinarritutako haurrentzako formulan melaminaren kutsadura zehaztu zen HPLC-UV erabiliz. Melamina-kontzentrazioak < 0,2 eta 2,52 mg kg−1 artean egon ziren. HPLC-UV metodoaren tarte dinamiko lineala 0,05 eta 2,5 mg kg−1 artekoa izan zen behi-esnearentzat, 0,13 eta 6,25 mg kg−1 artekoa %15 baino gutxiagoko proteina-frakzioa duen haurtxoentzako formularentzat, eta 0,25 eta 12,5 mg kg−1 artekoa %15eko proteina-frakzioa duen haurtxoentzako formularentzat. LOD (eta LOQ) emaitzak 0,03 mg kg−1 (0,09 mg kg−1) izan ziren behi-esnearentzat, 0,06 mg kg−1 (0,18 mg kg−1) %15eko proteina duen haurtxoentzako formularentzat, eta 0,12 mg kg−1 (0,36 mg kg−1) %15eko proteina duen haurtxoentzako formularentzat, 3 eta 1025eko seinale-zarata erlazioarekin LOD eta LOQ-rako, hurrenez hurren. Diebes et al. (2012) melamina mailak ikertu zituzten haurtxoentzako formula eta esne-hauts laginetan HPLC/DMD erabiliz. Haurtxoentzako esne-formulan, maila baxuenak eta altuenak 9,49 mg kg−1 eta 258 mg kg−1 izan ziren, hurrenez hurren. Detekzio-muga (LOD) 0,05 mg kg−1 izan zen.
Javaid et al.-ek jakinarazi zuten haurrentzako esne-formulan melamina hondarrak 0,002-2 mg kg−1 bitartekoak zirela Fourier transformazio infragorri espektroskopia bidez (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3,5 mg kg−1). Rezai et al.27-ek HPLC-DDA (λ = 220 nm) metodo bat proposatu zuten melamina kalkulatzeko eta 0,08 μg mL−1-ko LOQ lortu zuten esne-hautsarentzat, ikerketa honetan lortutako maila baino txikiagoa. Sun et al.-ek RP-HPLC-DAD bat garatu zuten esne likidoan melamina detektatzeko fase solidoko erauzketaren (SPE) bidez. 18 eta 60 μg kg−128-ko LOD eta LOQ lortu zituzten, hurrenez hurren, egungo ikerketa baino sentikorragoa dena. Montesano et al. HPLC-DMD metodoaren eraginkortasuna berretsi zuen proteina-osagarrietan melamina-edukia ebaluatzeko, 0,05-3 mg/kg-ko kuantifikazio-mugarekin, eta hau ikerketa honetan erabilitako metodoa baino sentikortasun gutxiagokoa izan zen29.
Zalantzarik gabe, analisi-laborategiek ingurumena babesteko zeregin garrantzitsua dute, hainbat laginetako kutsatzaileak kontrolatuz. Hala ere, erreaktibo eta disolbatzaile ugari erabiltzeak analisietan hondakin arriskutsuak sor ditzake. Hori dela eta, kimika analitiko berdea (GAC) garatu zen 2000. urtean, prozedura analitikoek operadoreengan eta ingurumenean dituzten ondorio kaltegarriak murrizteko edo ezabatzeko26. Melamina identifikatzeko, kromatografia, elektroforesia, elektroforesi kapilar eta entzima-lotutako immunosorbente-analisia (ELISA) barne, erabili dira melamina detektatzeko. Hala ere, detekzio-metodo ugarien artean, sentsore elektrokimikoek arreta handia erakarri dute beren sentikortasun bikainagatik, selektibitateagatik, analisi-denbora azkarragatik eta erabilerrazak diren ezaugarriengatik30,31. Nanoteknologia berdeak bide biologikoak erabiltzen ditu nanomaterialak sintetizatzeko, eta horrek hondakin arriskutsuen sorrera eta energia-kontsumoa murriztu ditzake, eta horrela praktika jasangarrien ezarpena sustatu. Adibidez, ingurumena errespetatzen duten materialekin egindako nanokonpositeak biosentsoreetan erabil daitezke melamina bezalako substantziak detektatzeko32,33,34.
Ikerketak erakusten du fase solidoko mikroerauzketa (SPME) eraginkortasunez erabiltzen dela erauzketa-metodo tradizionalen aldean duen energia-eraginkortasun eta iraunkortasun handiagoagatik. SPMEren ingurumen-errespetuak eta energia-eraginkortasunak alternatiba bikaina bihurtzen dute kimika analitikoan erauzketa-metodo tradizionalen aldean, eta laginak prestatzeko metodo iraunkorragoa eta eraginkorragoa eskaintzen dute35.
2013an, Wu et al.-ek gainazaleko plasmoi erresonantzia (mini-SPR) biosentsore oso sentikor eta selektibo bat garatu zuten, melamina eta anti-melamina antigorputzen arteko akoplamendua erabiltzen duena haurrentzako esne-formulan melamina azkar detektatzeko immunoanalisi bat erabiliz. SPR biosentsorea immunoanalisi batekin konbinatuta (melamina-konjugatutako behi-serumeko albumina erabiliz) erabiltzeko erraza eta kostu txikiko teknologia da, 0,02 μg mL-136-ko detekzio-muga baino ez duena.
Nasiri eta Abbasianek potentzial handiko sentsore eramangarri bat erabili zuten grafeno oxido-kitosano konpositeekin (GOCS) konbinatuta melamina detektatzeko lagin komertzialetan37. Metodo honek selektibitate, zehaztasun eta erantzun ultra-altua erakutsi zuen. GOCS sentsoreak sentikortasun nabarmena (239,1 μM−1), 0,01 eta 200 μM arteko tarte lineala, 1,73 × 104 afinitate-konstantea eta 10 nM arteko LOD erakutsi zituen. Gainera, Chandrasekhar et al.-ek 2024an egindako ikerketa batek ikuspegi ekologiko eta kostu-eraginkorra hartu zuen. Papaia azalaren erauzkin bat erabili zuten erreduzitzaile gisa zink oxido nanopartikulak (ZnO-NP) sintetizatzeko metodo ekologiko batean. Ondoren, mikro-Raman espektroskopia teknika berezi bat garatu zen haurrentzako formulan melamina zehazteko. Nekazaritza-hondakinetatik eratorritako ZnO-NP-ek potentziala erakutsi dute diagnostiko-tresna baliotsu gisa eta melamina monitorizatu eta detektatzeko teknologia fidagarri eta kostu txiki gisa38.
Alizadeh et al. (2024) metal-organiko marko (MOF) fluoreszentzia plataforma oso sentikorra erabili zuten esne hautsean melamina zehazteko. Sentsorearen detekzio-tarte lineala eta beheko detekzio-muga, 3σ/S erabiliz zehaztuta, 40 eta 396,45 nM artekoak ziren (25 μg kg−1 eta 0,25 mg kg−1 arteko baliokidea) eta 40 nM (25 μg kg−1 arteko baliokidea), hurrenez hurren. Tarte hau haurrentzako formulan melamina identifikatzeko (1 mg kg−1) eta beste elikagai/pentsu lagin batzuetan (2,5 mg kg−1) ezarritako hondakin-maila maximoen (MRL) oso azpitik dago. Sentsore fluoreszenteak (terbio (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) zehaztasun handiagoa eta neurketa-gaitasun zehatzagoa erakutsi zuen HPLC39 baino esne hautsean melamina detektatzeko. Kimika berdeko biosentsoreek eta nanokonpositeek ez dituzte detekzio-gaitasunak hobetzen bakarrik, baita ingurumen-arriskuak minimizatzen ere, garapen jasangarriaren printzipioekin bat etorriz.
Kimika berdearen printzipioak melamina zehazteko hainbat metodotan aplikatu dira. Ikuspegi bat mikroerauzketa metodo solido dispertsibo berde baten garapena da, β-ziklodextrina polimero polar naturala azido zitrikoarekin gurutzatuta erabiliz, melamina 40 eraginkortasunez erauzteko, hala nola haurrentzako formula eta ur beroa bezalako laginetatik. Beste metodo batek Mannich erreakzioa erabiltzen du esne laginetan melamina zehazteko. Metodo hau merkea, ingurumena errespetatzen duena eta oso zehatza da, 0,1-2,5 ppm-ko tarte linealarekin eta detekzio muga baxuarekin 41. Gainera, esne likidoan eta haurrentzako formulan melamina kuantitatiboki zehazteko metodo kostu-eraginkor eta ingurumena errespetatzen duena garatu zen Fourier transformazioko infragorri transmisio espektroskopia erabiliz, zehaztasun handiarekin eta 1 ppm eta 3,5 ppm-ko detekzio mugak, hurrenez hurren 42. Metodo hauek kimika berdearen printzipioen aplikazioa erakusten dute melamina zehazteko metodo eraginkor eta jasangarrien garapenean.
Hainbat ikerketek melamina detektatzeko metodo berritzaileak proposatu dituzte, hala nola fase solidoko erauzketaren eta errendimendu handiko likido kromatografiaren (HPLC) erabilera43, baita errendimendu handiko likido kromatografia azkarra (HPLC) ere, zeinak ez baitu aurretratamendu konplexurik edo ioi-pare erreaktiborik behar, eta horrela hondakin kimikoen kopurua murrizten da44. Metodo hauek ez dituzte emaitza zehatzak ematen esnekietan melamina zehazteko, baita kimika berdearen printzipioak ere betetzen dituzte, produktu kimiko arriskutsuen erabilera minimizatuz eta prozesu analitikoak ingurumenean duen eragin orokorra murriztuz.
Marka ezberdinetako berrogei lagin hirukoiztuta aztertu ziren, eta emaitzak 2. taulan ageri dira. Haur-esnearen formulako eta esne-hautseko laginetan melamina-mailak 0,001etik 0,004 mg/kg-ra eta 0,001etik 0,095 mg/kg-ra bitartekoak ziren, hurrenez hurren. Ez zen aldaketa esanguratsurik ikusi haur-esnearen hiru adin-taldeen artean. Gainera, melamina esne-hautsaren % 80an detektatu zen, baina haur-esnearen formulen % 65 melaminarekin kutsatuta zeuden.
Esne-hauts industrialean melamina-edukia haurrentzako formulan baino handiagoa zen, eta aldea esanguratsua zen (p<0,05) (2. irudia).
Lortutako emaitzak FDAk ezarritako mugen azpitik egon ziren (1 eta 2,5 mg/kg-ren azpitik). Gainera, emaitzak CACek (2010) eta EU45,46k ezarritako mugekin bat datoz, hau da, baimendutako gehienezko muga 1 mg kg-1 da haurrentzako esne-formularentzat eta 2,5 mg kg-1 esnekientzat.
Ghanati et al.-ek 2023an egindako ikerketa baten arabera47, Iranen ontziratutako esne mota desberdinetan melamina edukia 50,7 eta 790 μg kg−1 artekoa zen. Haien emaitzak FDAk baimendutako mugaren azpitik zeuden. Gure emaitzak Shoder et al.-enak48 eta Rima et al.-enak49 baino txikiagoak dira. Shoder et al. (2010) aurkitu zuten ELISA bidez zehaztutako esne-hautseko melamina mailak (n=49) 0,5 eta 5,5 mg/kg artekoak zirela. Rima et al.-ek esne-hautseko melamina hondarrak aztertu zituzten fluoreszentzia espektrofotometria bidez eta aurkitu zuten esne-hautseko melamina edukia 0,72–5,76 mg/kg zela. Ikerketa bat egin zen Kanadan 2011n haurrentzako formulako melamina mailak (n=94) kontrolatzeko kromatografia likidoa (LC/MS) erabiliz. Melamina kontzentrazioak muga onargarriaren azpitik zeudela ikusi zen (aurretiazko estandarra: 0,5 mg kg−1). Litekeena da detektatutako melamina maila iruzurrezkoak proteina edukia handitzeko erabilitako taktika bat izatea. Hala ere, ezin da azaldu ongarrien erabilerarekin, ontzien edukia lekualdatzearekin edo antzeko faktoreekin. Gainera, Kanadara inportatutako esne-hautsean melaminaren jatorria ez zen agerian utzi50.
Hassani et al.-ek esne-hautsaren eta esne likidoaren melamina-edukia neurtu zuten Irango merkatuan 2013an, eta antzeko emaitzak aurkitu zituzten. Emaitzek erakutsi zuten esne-hauts eta esne likido marka bat izan ezik, gainerako lagin guztiak melaminarekin kutsatuta zeudela, 1,50 eta 30,32 μg g−1 arteko mailekin esne-hautsean eta 0,11 eta 1,48 μg ml−1 arteko mailekin esnean. Aipagarria da azido zianurikoa ez zela detektatu lagin batean ere, eta horrek murriztu egiten du kontsumitzaileentzat melaminaren intoxikazio-aukera. 51 Aurreko ikerketek melamina-kontzentrazioa ebaluatu dute esne-hautsa duten txokolate-produktuetan. Inportatutako laginen % 94 inguruk eta Irango laginen % 77k melamina zuten. Inportatutako laginen melamina-mailak 0,032 eta 2,692 mg/kg artekoak ziren, eta Irango laginenak, berriz, 0,013 eta 2,600 mg/kg artekoak. Oro har, melamina laginen % 85ean detektatu zen, baina marka espezifiko bakar batek zituen baimendutako mugaren gainetik dauden mailak.44 Tittlemier et al.-ek jakinarazi zuten esne-hautsean 0,00528 eta 0,0122 mg/kg arteko melamina-mailak zeudela.
3. taulak hiru adin-taldeen arriskuen ebaluazioaren emaitzak laburbiltzen ditu. Arriskua 1 baino txikiagoa izan zen adin-talde guztietan. Beraz, ez dago haurrentzako esne-formulan melaminak osasunerako arrisku kartzinogenikorik ez duenik.
Esnekietan kutsadura-maila baxuagoak prestatzean zehar nahi gabeko kutsaduraren ondorio izan daitezke, eta maila altuagoak, berriz, nahitako gehikuntzen ondorio. Gainera, melamina-maila baxua duten esnekiak kontsumitzeak gizakien osasunerako dakarren arrisku orokorra txikia dela uste da. Ondoriozta daiteke melamina-maila baxuak dituzten produktuak kontsumitzeak ez duela inolako arriskurik sortzen kontsumitzaileen osasunerako52.
Esneki-industrian elikagaien segurtasun-kudeaketaren garrantzia kontuan hartuta, batez ere osasun publikoa babesteko orduan, oso garrantzitsua da esne-hautsean eta haurrentzako formulan melamina-mailak eta -hondakinak ebaluatu eta alderatzeko metodo bat garatzea eta baliozkotzea. HPLC-UV espektrofotometria-metodo sinple eta zehatz bat garatu zen haurrentzako formulan eta esne-hautsean melamina zehazteko. Metodoa balioztatu zen bere fidagarritasuna eta zehaztasuna bermatzeko. Metodoaren detekzio- eta kuantifikazio-mugak nahikoa sentikorrak zirela frogatu zen haurrentzako formulan eta esne-hautsean melamina-mailak neurtzeko. Gure datuen arabera, melamina detektatu zen Irango lagin gehienetan. Detektatutako melamina-maila guztiak CACek ezarritako gehienezko muga baimenduen azpitik zeuden, eta horrek adierazten du esneki mota horien kontsumoak ez duela arriskurik sortzen gizakien osasunerako.
Erabilitako erreaktibo kimiko guztiak kalitate analitikokoak ziren: melamina (2,4,6-triamino-1,3,5-triazina) % 99 purua (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); HPLC mailako azetonitriloa (Merck, Darmstadt, Alemania); ur ultrapurua (Millipore, Morfheim, Frantzia). Botatzeko xiringa-iragazkiak (Chromafil Xtra PVDF-45/25, poro-tamaina 0,45 μm, mintz-diametroa 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Alemania).
Laginak prestatzeko, ultrasoinu bainu bat (Elma, Alemania), zentrifugatzaile bat (Beckman Coulter, Krefeld, Alemania) eta HPLC (KNAUER, Alemania) erabili ziren.
UV detektagailu batekin hornitutako errendimendu handiko likido kromatografo bat (KNAUER, Alemania) erabili zen. HPLC analisi baldintzak hauek izan ziren: ODS-3 C18 zutabe analitiko batekin (4,6 mm × 250 mm, partikula tamaina 5 μm) (MZ, Alemania) hornitutako UHPLC Ultimate sistema bat erabili zen. HPLC eluentea (fase mugikorra) TFA/metanol nahasketa bat izan zen (450:50 mL) 1 mL min-1-ko emari-abiadurarekin. Detekzio uhin-luzera 242 nm izan zen. Injekzio bolumena 100 μL izan zen, zutabearen tenperatura 20 °C-koa. Sendagaiaren atxikipen-denbora luzea denez (15 minutu), hurrengo injekzioa 25 minutu igaro ondoren egin behar da. Melamina identifikatu zen atxikipen-denbora eta melamina estandarren UV espektroaren gailurra alderatuz.
Melamina-soluzio estandar bat (10 μg/mL) urarekin prestatu eta hozkailuan gorde zen (4 °C), argitik babestuta. Diluitu stock-soluzioa fase mugikorrekin eta prestatu lan-soluzio estandarrak. Soluzio estandar bakoitza HPLC-n 7 aldiz injektatu zen. 10 kalibrazio-ekuazioa kalkulatu zen zehaztutako gailur-azaleraren eta zehaztutako kontzentrazioaren erregresio-analisi bidez.
Behi-esne hautsa (20 lagin) eta behi-esnean oinarritutako haurrentzako formula marka desberdinen laginak (20 lagin) Irango supermerkatu eta farmazietan erosi ziren adin-talde desberdinetako (0-6 hilabete, 6-12 hilabete eta >12 hilabete) haurtxoak elikatzeko eta hozkailuan gorde ziren (4 °C) analisiak egin arte. Ondoren, 1 ± 0,01 g esne hauts homogeneizatu pisatu eta azetonitrilo:urarekin nahastu zen (50:50, v/v; 5 mL). Nahastea minutuz irabiatu zen, ondoren ultrasoinu bainu batean sonikatu zen 30 minutuz, eta azkenik minutuz astindu. Nahastea 9000 × g-tan zentrifugatu zen 10 minutuz giro-tenperaturan eta gainnadan dagoen likidoa 2 ml-ko autolagingailu-fialean iragazi zen 0,45 μm-ko xiringa-iragazki bat erabiliz. Iragazkia (250 μl) urarekin (750 μl) nahastu eta HPLC sisteman injektatu zen10,42.
Metodoa balioztatzeko, berreskurapena, zehaztasuna, detekzio-muga (LOD), kuantifikazio-muga (LOQ) eta zehaztasuna zehaztu genituen baldintza optimoetan. LOD oinarrizko zarata-mailaren hirukoitza gailurraren altuera duen lagin-edukia bezala definitu zen. Bestalde, seinale-zarata erlazioaren 10 aldiz gailurraren altuera duen lagin-edukia LOQ gisa definitu zen.
Gailuaren erantzuna zazpi datu-puntuz osatutako kalibrazio-kurba bat erabiliz zehaztu zen. Melamina-eduki desberdinak erabili ziren (0, 0,2, 0,3, 0,5, 0,8, 1 eta 1,2). Melamina kalkulatzeko prozeduraren linealtasuna zehaztu zen. Horrez gain, melamina-maila desberdinak gehitu zitzaizkien lagin hutsei. Kalibrazio-kurba eraiki zen 0,1–1,2 μg mL−1 melamina-soluzio estandar baten etengabe injektatuz haurrentzako formula-laginetan eta esne-hauts laginetan, eta bere R2 = 0,9925 izan zen. Zehaztasuna prozeduraren errepikagarritasunaren eta erreproduzigarritasunaren bidez ebaluatu zen, eta lehenengo eta ondorengo hiru egunetan laginak injektatuz lortu zen (hirukoiztuta). Metodoaren errepikagarritasuna RSD % kalkulatuz ebaluatu zen gehitutako hiru melaminaren kontzentrazio desberdinetarako. Berreskuratze-azterketak egin ziren zehaztasuna zehazteko. Erauzketa-metodoaren bidezko berreskuratze-maila melamina-kontzentrazio hiru mailatan kalkulatu zen (0,1, 1,2, 2) haurrentzako formula-esnearen eta esne lehorraren laginetan9,11,15.
Eguneko kontsumo estimatua (EDI) formula hau erabiliz zehaztu zen: EDI = Ci × Cc/BW.
Non Ci melamina edukiaren batez bestekoa den, Cc esne-kontsumoa eta BW haurren batez besteko pisua.
Datuen analisia SPSS 24 erabiliz egin zen. Normaltasuna Kolmogorov-Smirnov testa erabiliz egiaztatu zen; datu guztiak proba ez-parametrikoak ziren (p = 0). Beraz, Kruskal-Wallis testa eta Mann-Whitney testa erabili ziren taldeen arteko desberdintasun esanguratsuak zehazteko.
Ingelfinger, Jr. Melamina eta bere eragina elikagaien kutsadura globalean. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, et al. pH-aren eragina haurrentzako ontzietako melaminaren migrazioan. International Journal of Food Contamination, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP eta Gilbert, IH Konposatu toxikoak tripanosomen barnealdera bideratzea. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, et al. Melamina dendrimeroen in vitro eta in vivo ebaluazioa sendagaiak emateko ibilgailu gisa. International Journal of Pharmacy, 281(1–2), 129–132(2004).
Osasunaren Mundu Erakundea. Melaminaren eta azido zianurikoaren alderdi toxikologikoak berrikusteko 1-4 adituen bilerak (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH eta Lee, PK-T. Melaminaren toxikotasuna eta giltzurruna. Journal of the American Society of Nephrology 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. eta Demir, N. IMAC adsorbente berri baten garapena esnekietan melamina identifikatzeko errendimendu handiko kromatografia likidoaren (HPLC) bidez. Journal of Food Synthesis and Analysis 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. eta Imim, A. Mannich berde erreakzioan oinarritutako melaminaren espektrofotometria bidezko determinazio sinplea esne likidoan. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. eta El-Habib, R. Melaminaren zehaztapena haurrentzako esne-formulan, esne-hautsean eta pangasius laginetan HPLC/diodoen sareko kromatografia bidez. Journal of Environmental Analytical Toxicology, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, eta Osterloh, JD Melaminaren toxikotasuna. Journal of Medical Toxicology, 6, 50–55 (2010).
Osasunaren Mundu Erakundea (OME), Melaminaren eta azido zianurikoaren toxikologia eta osasun alderdiak: OME/FAOren adituen bilera kolaboratibo baten txostena, Health Canada-k babestua, Ottawa, Kanada, 2008ko abenduaren 1-4 (2009).
Korma, SA, et al. Lipido estruktural funtzional berriak dituen haurrentzako formula-hautsaren eta haurrentzako formula komertzialen lipidoen osaera eta kalitatearen azterketa konparatiboa. European Food Research and Technology 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. eta Hashem, H. Haurtxoentzako esne-formularen nutrizio-balioa, kalitate-atributuak eta iraupena hobetzea palma-olioa erabiliz. Middle East Journal of Agricultural Research 6, 274–281 (2017).
Yin, W., et al. Melaminaren aurkako antigorputz monoklonalen ekoizpena eta zeharkako ELISA metodo lehiakor baten garapena esne gordinean, esne lehorrean eta animalien pentsuetan melamina detektatzeko. Journal of Agricultural and Food Chemistry 58(14), 8152–8157 (2010).